ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2286790

СПОСІБ ЛІКУВАННЯ стресового нетримання сечі

СПОСІБ ЛІКУВАННЯ стресового нетримання сечі

Ім'я винахідника: Кулаков Володимир Іванович (RU); Сухих Геннадій Тихонович (RU); Балан Віра Юхимівна (RU); Сметник Віра Петрівна (RU)
Ім'я патентовласника: Державна установа Науковий центр акушерства, гінекології та перинатології Російської академії медичних наук
Адреса для листування: 117997, Москва, вул. Акад. Опаріна, 4, ГУ НЦ акушерства, гінекології та перинатології РАМН, директорові
Дата початку дії патенту: 2005.03.16

Винахід відноситься до галузі медицини і стосується лікування стресового нетримання сечі у жінок шляхом введення фетальних стовбурових клітин. У рабдосфінктер парауретральнимі вводять 40 млн. Стовбурових міобластів і фібробластів, отриманих від плодів 8-12 тижнів гестації, при співвідношенні клітин 5-4: 3-2. Спосіб розширює арсенал засобів лікування стресового нетримання сечі у жінок, дозволяє виключити хірургічне втручання.

ОПИС ВИНАХОДИ

Винахід відноситься до терапії, зокрема до способів лікування стресового нетримання сечі.

Урогенітальні розлади в клімактерії - комплекс вагінальних і сечових симптомів, розвиток яких є ускладненням атрофічних і дистрофічних процесів в естрогензалежних тканинах і структурах нижньої третини сечостатевого тракту: сечовому міхурі, уретрі, піхву, зв'язках і м'язах тазового дна.

В даний час єдиним способом лікування стресового нетримання сечі є хірургічний, який налічує понад 200 модифікацій (Х.Хірш, О.Кезер, Ф.Ікле "Оперативна гінекологія" Вид-во ГЕОТАР Медицина, М., 1999, стр.407).

Недоліком способу є висока частота рецидивів і ускладнення, зумовлені хірургічним втручанням.

Описана спроба лікування нетримання сечі у 8 пацієнтів шляхом трансуретральної ін'єкції в рабдосфінктер і уретру комбінації аутологічних стовбурових клітин, похідних м'язової тканини і клітин сполучної тканини (Shiomo Pas MD "Stem cell offer exciting approach to urinary incontinence treatment" Urology Times 1 July, 2004).

Хоча популяція плюрипотентних клітин була отримана з скелетних м'язів, проте автори документа не наводять даних, що підтверджують, що використовуються клітини насправді були стовбуровими, так само як і про успіх лікування в тимчасовому інтервалі.

Недоліком способу є його тривалість, пов'язана з необхідністю забору клітинного матеріалу і вирощуванням стовбурних клітин на його основі.

Завдання винаходу - спрощення способу лікування стресового нетримання сечі у жінок за рахунок використання більш доступного аллогенного клітинного матеріалу.

Поставлена ​​задача вирішується способом лікування нетримання сечі, що полягає в тому, що вводять алогенних ембріональні або фетальні соматичні стовбурові клітини людини - міобласти і фібробласти при їх співвідношенні 5-4: 3-2 парауретральнимі в рабдосфінктер.

Отримання культури клітин, збагаченої миобластами людини для подальшої трансплантації.

Трупний абортивний матеріал доставляли в аутопсійного блок в термоконтейнері (+ 4 ° С) не пізніше, ніж через 4 години після штучного переривання вагітності. Плоди відмивали стерильним фізіологічним розчином з антибіотиками. Поперечно-смугасті м'язи виділяли з плодів людини 8-12 тижнів гестації, відмивали забуферений фізіологічним розчином (PBS) рН 7,3 з додаванням антибіотиків. Фрагменти м'язової тканини піддавали механічній диссекции в стерильних чашках Петрі (35 мм) до розмірів не більше 1,0 мм × 1,0 мм. Двічі відмивали PBS, Центріфугіруем при 800 g протягом 3-х хвилин. Шматочки м'язової тканини діссіцііровалі на окремі клітини инкубацией при 37 ° С з 0,2% колагеназою протягом 15 хвилин. Потім відмивали двічі PBS.

Популяцію клітин, збагачену миобластами, поміщали в культуральні флакони в концентрації 500000 кл / мл в середовищі для культури клітин: F12 і DMEM в співвідношенні 1: 1, з додаванням фетальної ембріональної сироватки, L-глютамина, хепеса, бікарбонату натрію, антибіотиків. Клітини культивували при 37 ° С в атмосфері з 5% СО2 до отримання моношару, фібробласти видаляли при пасирування. Зміну середовища проводили кожні 3 дні на 50-75%. Суспензію, збагачену миобластами, культивували за вищеописаною схемою до 3 пасажу, потім використовували для трансплантації або заморожували за стандартною програмою з перенесенням в рідкий азот.

Отримання культури клітин фібробластів людини для подальшої трансплантації.

Трупний абортивний матеріал доставляли в аутопсійного блок в термоконтейнері (+ 4 ° С) не пізніше, ніж через 4 години після штучного переривання вагітності. Плоди відмивали стерильним фізіологічним розчином з антибіотиками. Тканина шкіри виділяли з плодів людини 8-12 тижнів гестації, відмивали забуферений фізіологічним розчином (PBS) рН = 7,3 з додаванням антибіотиків. Фрагменти шкіри піддавали механічній диссекции в стерильних чашках Петрі (35 мм) до розмірів не більше 1,0 мм × 1,0 мм. Двічі відмивали PBS, Центріфугіруем при 800 g протягом 3-х хвилин. Шматочки м'язової тканини діссіцііровалі на окремі клітини инкубацией при 37 ° С з 0,2% колагеназою протягом 25 хвилин. Потім відмивали двічі PBS.

Популяцію клітин, збагачену фибробластами, поміщали в культуральні флакони в концентрації 500000 кл / мл в середовищі для культури клітин: F12 і DMEM в співвідношенні 1: 1, з додаванням 10% фетальної сироватки теляти, L-глютамина, хепеса, бікарбонату натрію, антибіотиків. Клітини культивували при 37 ° С в атмосфері з 5% СО2 до отримання моношару. Зміну середовища проводили кожні 3 дні на 50-75%. Фібробласти культивували за вищеописаною схемою до 3 пасажу, потім використовували для трансплантації або заморожували за стандартною програмою з перенесенням в рідкий азот.

Наступний приклад ілюструє спосіб даного винаходу.

Хвора Л.К., 55 років, страждає стресовим нетриманням сечі протягом 5 років. Кашлевая проба позитивна, проба Вальсалви позитивна, комплексне уродинамічне дослідження - недостатність замикальних апарату сечового міхура, зниження максимального внутриуретрального тиску на 50%, лікування замісної гормональної терапією без ефекту. Пацієнтці парауретральнимі в рабдосфінктер ввели 40 млн. Ембріональних стовбурових міобластів і фібробластів при співвідношенні клітин 4: 2.

Спостереження за хворою вже через два тижні показало клінічне поліпшення:

1. Утримує сечу при навантаженні (кашель, сміх).

2. Проба Вальсалви негативна.

Подальше спостереження за пацієнткою (протягом 5 місяців) показало збереження лікувального ефекту.

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

Спосіб лікування стресового нетримання сечі у жінок шляхом введення клітинного матеріалу в рабдосфінктер, що відрізняється тим, що в рабдосфінктер парауретральнимі вводять 40 млн. Стовбурових міобластів і фібробластів, отриманих від плодів 8-12 тижнів гестації, при співвідношенні клітин 5-4: 3-2.

Версія для друку
Дата публікації 06.01.2007гг


НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ

Технологія виготовлення універсальних муфт для бесварочного, безрезьбовиє, бесфлянцевого з'єднання відрізків труб в трубопроводах високого тиску (мається відео)
Технологія очищення нафти і нафтопродуктів
Про можливість переміщення замкнутої механічної системи за рахунок внутрішніх сил
Світіння рідини в тонких діелектричних каналох
Взаємозв'язок між квантової і класичної механікою
Міліметрові хвилі в медицині. Новий погляд. ММВ терапія
магнітний двигун
Джерело тепла на базі нососних агрегатів