ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2242001

СПОСІБ ОЦІНКИ ТЯЖКОСТІ ПЕРЕБІГУ ПСОРІАЗУ

СПОСІБ ОЦІНКИ ТЯЖКОСТІ ПЕРЕБІГУ ПСОРІАЗУ

Ім'я винахідника: Курник Г.Ю. (RU); Новіков В.В. (RU); Савкіна Ю.С. (RU); Крижанова М.А.
Ім'я патентовласника: Державна установа "Нижегородський науково-дослідний шкірно-венерологічний інститут"
Адреса для листування: 603950, м.Нижній Новгород, вул. Коваліхінская, 49Г, ГУ ННІКВІ
Дата початку дії патенту: 2003.04.30

Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до дерматовенерології, і може бути використано для оцінки тяжкості перебігу псоріазу. Суть винаходу полягає у визначенні в сироватці крові змісту розчинної форми антигену HLA I класу і при підвищенні рівня HLA I класу більше 2000 ОД / мл встановлюють важкий перебіг псоріазу, а при значенні менше ніж 2000 ОД / мл - легкий перебіг. Технічним результатом є підвищення точності оцінки тяжкості перебігу псоріазу.

ОПИС ВИНАХОДИ

Винахід відноситься до галузі медицини, зокрема дерматовенерології, і може бути використано для оцінки тяжкості перебігу псоріазу.

Псоріаз є хронічним захворюванням шкіри з різноманітними клінічними проявами. Причини виникнення псоріазу досі залишаються нез'ясованими.

В даний час псоріаз розглядається як системне захворювання, в якому важливу роль відіграє імунна система організму (Мордовцев В.П., Мушет Г.В., Альбанова В.І. Псоріаз (патогенез, лікування, клініка). - Кишенев: Штіінца, 1991 ).

В останні роки з'явилися дані, що в реалізації імунної відповіді беруть участь розчинні форми мембранних антигенів імунокомпетентних клітин (Новіков В.В. Розчинні форми дифференцировочного антигенів гемопоетичних клітин // Гематологія і трансфузіологія. 1996 року, №6, С.40-43). Було встановлено, що людські лімфоцити при активації секретують значні кількості розчинної форми молекул HLA I класу (sHLA-I). Фізіологічна концентрація sHLA-I значно підвищується в процесі запалення. Це говорить про те, що sHLA-I може служити маркером патологічних змін в організмі (Голенков А.К., Мітіна Т.А., Новіков В.В. та ін. Клінічне значення розчинних молекул адгезії (sCD50 - ICAM-3), апоптозу (sCD95) і sHLA класу I при лімфопроліферативних захворюваннях // Російський біотерапевтичних журнал, 2002 №1, С.60-64).

Спроба виділити специфічні для псоріазу порушення імунної системи до цих пір не увінчалися успіхом, а виявлені зміни знаходяться в рамках імунної відповіді при запальної реакції на пошкодження (В.Н.Шілов. Псоріаз - вирішення проблеми. - М., 2001).

В даний час оцінка тяжкості перебігу псоріазу здійснюється клінічно за допомогою розрахунку індексу поширеності та гостроти процесу (індекс PASI), заснованого на визначенні лущення, площі ураженої шкіри, ступеня інфільтрації і еритеми (Frederiksson, T.Pettersson, V.Dermatologika, 1978, 157; Мордовець В.Н. та ін. Псоріаз (патогенез, клініка, лікування). - Кишинів: Штіінца, 1991, с.16-128).

Однак, визначення тяжкості перебігу псоріазу даними способом утруднене через суб'єктивність оцінки.

Завдання даного винаходу - підвищення точності оцінки тяжкості перебігу псоріазу.

Поставлена ​​задача вирішується тим, що у хворого шляхом забору крові з периферичної вени отримують сироватку, визначають в ній вміст розчинної форми антигену HLA I класу і при підвищенні рівня HLA I класу більше 2000 ОД / мл встановлюють важкий перебіг псоріазу, а при значенні менше ніж 2000 ОД / мл - легкий перебіг.

Спосіб здійснюється наступним чином

У хворого шляхом забору 1 мл крові з периферичної вени отримували сироватку. Як перші антитіл, сорбіруемих на тверду фазу (лунки планшета для ІФА), використовували моноклональні антитіла ІКО-53. Антитіла попередньо очищали ріванольним методом за загальноприйнятою методикою. Застосовувані в якості других антитіл МКА ІКО-216 Кон'юговані з пероксидазою хрону перійодатним методом (Вязьміна Е.С., 2002). Використовували розбірні полістиролові планшети виробництва "Медполимер", модифіковані ультрафіолетовим опроміненням.

Моноклональні антитіла ІКО-53 розводили 0,85% -ним розчином NaCl і вносили в лунки планшетів по 100 мкл в кожну. Планшети інкубували 24 годин при кімнатній температурі, потім 5-6 разів відмивали забуферений фосфатами фізіологічним розчином рН 7,4 (ФСР-Т).

Сироватку крові хворого, розведену попередньо в співвідношенні 1:10 розчином ФСР-Т, вносили в лунки планшетів в обсязі 100 мкл і інкубували 24 годин при кімнатній температурі. Потім планшети відмивали як описано вище і в лунки вносили по 100 мкл коньюгата моноклональних антитіл ІКО-216 з пероксидазою хрону в робочому розведенні. Планшети інкубували 45 хв при температурі 37 ° С і після відмивання в лунки вносили по 100 мкл розчину субстратной суміші, що містить 0,01% ортофенілендіамін і 0,05% Н 2 О 2 в цитратному буфері. Планшети інкубували 10 хв при кімнатній температурі, потім додавали в лунки по 50 мкл 0,1 М розчину H 2 SO 4. Облік результатів проводили при довжині хвилі 492 нм з використанням фотометра АиФ-М / 340.

Вміст розчинних молекул HLA I класу оцінювали в умовних одиницях (ОД / мл) і при підвищенні рівня HLA I класу більше 2000 ОД / мл встановлювали важкий перебіг псоріазу, а при значенні менше ніж 2000 ОД / мл - легкий перебіг.

Обстежено 90 хворих на псоріаз. У процесі вивчення даного параметра встановлено, що у хворих на псоріаз статистично достовірно підвищений вміст розчинних молекул HLA I класу до 2072 ± 285 ОД / мл. У здорових донорів вміст розчинних молекул HLA I класу дорівнювало 1012 ± 36 Од / мл.

У стаціонарній стадії спостерігалося збільшення рівня сироваткової форми молекул HLA I класу до 1816 ± 268 ОД / мл в порівнянні з контрольною групою (1012 ± 36 ОД / мл). У прогресуючій стадії захворювання рівень молекул HLA I класу підвищувався в більшій мірі і досягав концентрації, рівній 2764 ± 354 Од / мл.

Отримані дані свідчать про те, що сироватковий рівень розчинної форми молекул HLA 2 I класу асоційований з тяжкістю перебігу псоріазу.

У хворих при значенні даного показника вище 2000 ОД / мл констатувалося важкий перебіг псоріазу.

Приклади конкретного виконання.

Приклад 1. Хвора Г., надійшла в клініку Нижегородського науково-дослідного шкірно-венерологічного інституту 16.04.02 р з попереднім діагнозом псоріаз. Історія хвороби №892. Вік - 30 років. На шкірі тулуба, розгинальних поверхонь верхніх і нижніх кінцівок спостерігалися висипання у вигляді характерних псоріатичних бляшок. До лікування проведено дослідження вмісту розчинних молекул HLA I класу. Виявилося, що даний показник дорівнює 835 ОД / мл.

Висновок: у хворої визначається легкий перебіг псоріазу. Клінічний діагноз - поширений псоріаз, стаціонарна стадія. Подальше спостереження підтвердило вищевказаний висновок (стандартне лікування, виписка із стаціонару на 20 день).

Приклад 2. Хворий Ч., поступив у клініку Нижегородського науково-дослідного шкірно-венерологічного інституту 21.01.02 р з попереднім діагнозом псоріаз. Історія хвороби №153. Вік - 59 років. На шкірі тулуба, розгинальних поверхонь верхніх і нижніх кінцівок спостерігалися висипання у вигляді характерних псоріатичних бляшок. До лікування проведено дослідження вмісту розчинних молекул HLA I класу. Виявилося, що даний показник дорівнює 4590 ОД / мл.

Висновок: у хворої визначається важкий перебіг псоріазу. Клінічний діагноз - поширений псоріаз, прогресуюча стадія. Подальше спостереження підтвердило вищевказаний висновок (метотрексат в комплексній терапії, тривалість лікування 34 дня).

Приклад 3. Хвора Ш., надійшла в клініку Нижегородського науково-дослідного шкірно-венерологічного інституту 17.04.02 р з попереднім діагнозом псоріаз. Історія хвороби №908. Вік - 48 років. На шкірі тулуба, розгинальних поверхонь верхніх і нижніх кінцівок спостерігалися висипання у вигляді характерних псоріатичних бляшок. До лікування проведено дослідження вмісту розчинних молекул HLA I класу. Виявилося, що даний показник дорівнює 6020 ОД / мл.

Висновок: у хворої визначається важкий перебіг псоріазу. Клінічний діагноз - поширений псоріаз, прогресуюча стадія. Подальше спостереження підтвердило вищевказаний висновок (метотрексат в комплексній терапії, тривалість лікування 38 днів).

Таким чином, запропонований спосіб має перевагу в порівнянні з виявленими прототипом, що виражається в підвищенні точності та об'єктивності визначення тяжкості перебігу псоріатичного процесу.

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

Спосіб оцінки тяжкості перебігу псоріазу, що полягає в обстеженні хворого, який відрізняється тим, що шляхом забору крові з периферичної вени отримують сироватку, визначають в ній вміст розчинної форми антигену HLA I класу і при підвищенні рівня HLA I класу більше 2000 ОД / мл встановлюють важкий перебіг псоріазу , а при значенні менше ніж 2000 ОД / мл - легкий перебіг.

Версія для друку
Дата публікації 06.01.2007гг


НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ

Технологія виготовлення універсальних муфт для бесварочного, безрезьбовиє, бесфлянцевого з'єднання відрізків труб в трубопроводах високого тиску (мається відео)
Технологія очищення нафти і нафтопродуктів
Про можливість переміщення замкнутої механічної системи за рахунок внутрішніх сил
Світіння рідини в тонких діелектричних каналох
Взаємозв'язок між квантової і класичної механікою
Міліметрові хвилі в медицині. Новий погляд. ММВ терапія
магнітний двигун
Джерело тепла на базі нососних агрегатів