| початок розділу
Виробничі, аматорські радіоаматорські Авіамодельний, ракетомодельного Корисні, цікаві |
хитрощі майстру
електроніка фізика технології винаходи |
таємниці космосу
таємниці Землі таємниці Океану хитрощі Карта розділу |
  |
| Використання матеріалів сайту дозволяється за умови посилання (для сайтів - гіперпосилання) | |||
Навігація: => |
На головну / Каталог патентів / В розділ каталогу / Назад / |
|
ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2170935
СПОСІБ ДИФЕРЕНЦІАЛЬНОЇ ДІАГНОСТИКИ ДЕСТРУКТИВНИХ ЗМІН
При гострому холециститі
Ім'я винахідника: Грибанов Г.А .; Голубєв О.О .; Скрипниченко О.В .; Расул Ш.Х.
Ім'я патентовласника: Тверська державна медична академія
Адреса для листування: 170642, г.Тверь, вул. Радянська, 4, Тверська медакадемия
Дата початку дії патенту: 2000.04.14
Винахід відноситься до медицини, зокрема до внутрішніх хвороб та хірургії. Спосіб забезпечує високу точність диференційної діагностики. Проводять визначення аутолітичних змін до сироватки крові, при цьому після інкубації відразу і через 4, 12 і 24 ч визначають кількість глюкози, креатиніну та активність лактатдегідрогенази і при зниженні кількості глюкози і креатиніну до 35 і 30% відповідно і зростання активності лактатдегідрогенази в 1,5 рази діагностують деструктивну форму холециститу.
ОПИС ВИНАХОДИ
Винахід відноситься до медицини, а саме до хірургії і клінічної лабораторної діагностики.
Проблема вибору тактики лікування хворих з гострим калькульозним холециститом залишається як і раніше злободенною. Хірург часто стоїть перед вибором: - оперувати хворого на висоті нападу, коли застосування сучасних малоінвазивних способів лікування холециститу - лапароскопічної холецистектомії, холецистектомії з міні-доступу пов'язане зі значними технічними труднощами, або взагалі неможливо, - або проводити консервативне лікування, домагаючись купіруваннянападу, що дозволяє відстрочити операцію і виконати її в більш сприятливих умовах.
У зв'язку з цим представляється актуальною розробка нових способів оцінки ступеня вираженості деструктивних запальних змін жовчного міхура.
У хірургічній практиці діагноз гострого холециститу зазвичай ставиться за даними анамнезу та фізикального обстеження. З лабораторних методів діагностики використовується клінічний аналіз крові, де показником захворювання є кількість лейкоцитів. У типових випадках число лейкоцитів становить 10 - 15 Ч '10 9 / л зі зсувом формули крові вліво. і дещо підвищується білірубін (50 г / л) у 45% хворих і трансамінази (в 5 разів) у 25% хворих [1,2,3,4].
На думку авторів аналогом пропонованого нами способу є загальний клінічний аналіз крові. Але цей спосіб має недоліки, кількість лейкоцитів змінюється під впливом сезонних, кліматичних, фізіологічних станів організму, а й при різноманітної патології, що свідчить про малу інформативності даного способу, і неможливості оцінки з його допомогою ступеня запальної деструкції жовчного міхура.
Автори пропонують оригінальний спосіб диференціальної діагностики ступеня вираженості запальних, деструктивних змін при гострому холециститі - аутолітіческіе зміни в сироватці крові.
Спосіб аутолітичних змін в тканинах мозкової речовини білих щурів був запропонований Г.А. Грибанова [6] і використовується авторами як прототип.
Для метаболізму біохімічних з'єднань характерне поєднання процесів їх синтезу і розпаду. І одним з широко поширених біологічних явищ, де реакції розпаду, як правило, превалюють над синтетичними, є аутолиз [5].
В даний час завдяки використанню нових, сучасних методів аналізу різних біохімічних компонентів, а й на основі численних досліджень аутолітичних процесів в різних органах і тканинах і їх ультраструктури [6,7] були розроблені нові погляди і підходи до процесу аутолізу, було розроблено нове визначення процесу аутолиза. Процес аутолиза визначається як "вироблене в процесі еволюції властивість біологічних об'єктів розкладати ферментативним і не ферментативним шляхом власні структури різного рівня з переважним участю гідролазних, а й трансферазную і інших реакцій біодеградації і біотрансформації їх молекулярних компонентів" [6].
Для дослідження процесу аутолізу була використана сироватка крові здорових і хворих людей з клінічно встановленим діагнозом гострого холециститу, з розгорнутою картиною захворювання, підтвердженого спеціальними дослідженнями. В якості контролю дослідження проводилися у практично здорових людей. Всього було обстежено 56 чоловіків і жінок у віці від 40 до 60 років.
У роботі були розглянуті аутолітіческіе процеси при гострому холециститі з різним ступенем запальної деструкції жовчного міхура дві групи з незначними і сильними деструктивними змінами.
Забір крові проводили перед операцією, з ліктьової вени, натщесерце. Сироватку відокремлювали центрифугуванням при 3000 об / хв протягом 15 хвилин. Зразки сироватки крові (в обсязі 0,5 - 1,0 мл) інкубували в стерильних пробірках в термостаті при 37 o C.
Біохімічні параметри оцінювали в такі строки: відразу після отримання зразка - 0 годин, через 4, 12, 24 години після інкубації в термостаті. Вибір зазначених термінів дослідження обумовлений відмінностями в характері і інтенсивності аутолітіческого процесу в динаміці.
Для оцінки змін при аутолітіческімі процесі досліджували такі біохімічні параметри сироватки крові: глюкоза, загальний білок і фракції, серомукоїди, тимолова проба, сечовина, креатинін, сечова кислота, холестерин, тригліцериди, b-ліпопротеїди і ряд ферментів: аспартатамінотрансфераза, аланінамінотрансфераза, лужна фосфотаза, лактатдегидрогеназа і її термостабильная субодиниця, a-амілаза U -глютамат-трансфераза і холінестераза.
Біохімічні дослідження проводилися за уніфікованими клініко-біохімічним лабораторним методикам [8] з використанням напівавтоматичного аналізатора ФП-900.
Визначення глюкози.
Визначення проводили наборами фірми "Biocon". Принцип методу: 
Приготування реактивів: перед вживанням розчиняється в 50 мл дистильованої води суміш ліофілізованих реактивів і залишається для стабілізації на 30 хвилин. Стандартний розчин готовий до застосування, концентрація - 5,55 ммоль / л.
Проведення аналізу: до 0,9 мл робочого реактиву додається 10 мкл сироватки або стандартного розчину, перемішується і інкубується протягом 25 хв при 37 o C, фотометрирование проводиться при 500 нм, неодружена проба вимірюється по реактиву.
Визначення креатиніну.
Визначення проводили наборами фірми "Biocon"
Принцип методу (модифікований метод Яффі): креатинін разом з пікринової кислотою в лужному середовищі утворює забарвлений комплекс. Швидкість освіти забарвлення прямо пропорційна вмісту креатиніну в пробі.
Приготування реактивів: розчин насиченою пікринової кислоти, що містить 0,01% детергента, змішується з розчином NaOH 2,5 моль / л. Стандартний розчин креатиніну - 200 мкмоль / л у 0,1 моль / л HCl.
Проведення аналізу: 0,5 мл робочого реактиву прогрівають при 37 o C протягом 5 хвилин, далі змішують з досвідченим зразком або стандартним розчином в кількості 25 мкл і вимірюють.
Визначення ЛДГ.
Визначення проводиться наборами "ЛДГ-П" фірми "Biocon". Принцип методу: 
Реактив розчиняється в бидистиллированной воді і витримується 30 хвилин для стабілізації при кімнатній температурі. Реакція проводиться при 37 o C, кінетичної реакцією з часом затримки 30 секунд, час реакції 90 секунд, при 340 нм 500 мкл реактиву прогрівають протягом 5 хвилин, вносять 20 мкл досліджуваної проби, перемішують і стартують реакцію.
В результаті досліджень були виявлені найбільш значущі критерії для оцінки характеру аутолітичних змін для гострого холециститу, в їх числі опинилися глюкоза, сечова кислота, сечовина, креатинін, лужна фосфатаза, лактатдегідрогеназа. Всі інші досліджені біохімічні параметри не давали значних відхилень в динаміці аутолиза і надалі нами не розглядалися.
В процесі аутолиза виявлена стійка закономірність змін перерахованих вище біохімічних параметрів у порівнянні з контрольною групою здорових осіб в залежності від ступеня деструктивних змін жовчного міхура. Однак для розгляду представлені тільки зміни глюкози (вуглеводний обмін), креатиніну (азотний обмін) і зміни активності лактатдегідрогенази (фіг. 1, 2, 3).
В ході аутолиза сироватки крові у контрольної групи (здорових осіб) відхилення досліджуваних параметрів були незначними, в той час як у хворих відхилення від вихідних даних носили більш виражений характер. Так, наприклад, в ході дослідження аутолітичних змін вмісту глюкози у хворих з недеструктурірованним жовчним міхуром виявлено, що зміни були схожі із змінами у контрольної групи. А у хворих з вираженою запальною деструкцією вміст глюкози в сироватці крові знизився до кінця досліджуваного періоду на 35% (фіг. 1). При дослідженні змін вмісту креатиніну виявлено, що при гострій катаральній формі холециститу динаміка вмісту креатиніну подібна до динамікою контрольної групи (плавне зростання до кінця терміну інкубації у контрольної групи на 10% і 18% у хворих з катаральним холециститом), а при деструктивних формах холециститу вона протилежна, і вміст креатиніну знизилося в порівнянні з початковим рівнем майже на 30% (фіг.2). Дослідження зміни активності лактатдегідрогенази показали, що в нормі активність ферменту при аутолизе падає, при гострому катаральному холециститі вона достовірно не змінюється, при деструктивних формах холециститу спостерігається зростання активності ферменту в 1,5 рази (фіг. 3).
Таким чином, можна зробити висновок про можливість диференціальної діагностики за допомогою методу оцінки аутолітичних змін в сироватці крові хворого ступеня запального деструктивного зміни жовчного міхура.
ДЖЕРЕЛА ІНФОРМАЦІЇ
1. Арсеній А. К. Діагностика гострих запальних захворювань черевної порожнини. Кишинів. 1982. Стор. 76, 84, 95, 175.
2. Юрг Хегглин. Хірургічне обстеження. М., 1980, стор. 195.
3. Людський А.Г. Симптоматична діагностика хірургічних захворювань. 1973. Стор. 57.
4. Астапенко В.Г. Довідник з діагностики та диференціальної діагностики хірургічних хвороб. Мінськ, 1988. Стор. 96.
5. Лушніков Е.Ф. Шапіро Н.А. Аутоліз. - М .: 1974. Стор. 65.
6. Грибанов Г.А. Дослідження біохімічних перетворень ендогенних ліпідів біологічних структур при аутолизе: Дис. д-ра біологічних наук / КГУ. - Калінін, 1986. Стор. 461.
7. Скрипниченко О.В. Грибанов Г.А. Про використання аутолізірующейся сироватки крові хворих на ішемічну хворобу серця, інфарктом міокарда і атеросклероз з метою біохімічної диференціальної діагностики ТГУ. Вчені записки том IV. 1999. Стор. 37-39.
8. Меншиков В.В. Лабораторні методи дослідження в клініці. М .: Медицина, 1987. Стор. 86, 98, 112.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
Спосіб диференційної діагностики деструктивних змін при гострому холециститі, що включає визначення аутолітичних змін в сироватці крові, що відрізняється тим, що після інкубації відразу і через 4, 12 і 24 ч визначають кількість глюкози, креатиніну та активність лактатдегідрогенази і при зниженні кількості глюкози і креатиніну до 35 і 30% відповідно і зростання активності лактатдегідрогенази в 1,5 рази діагностують деструктивну форму холециститу.
Версія для друку
Дата публікації 29.03.2007гг
Коментарі
Коментуючи, пам'ятайте про те, що зміст і тон Вашого повідомлення можуть зачіпати почуття реальних людей, проявляйте повагу та толерантність до своїх співрозмовників навіть у тому випадку, якщо Ви не поділяєте їхню думку, Ваша поведінка за умов свободи висловлювань та анонімності, наданих інтернетом, змінює не тільки віртуальний, але й реальний світ. Всі коменти приховані з індексу, спам контролюється.