| початок розділу
Виробничі, аматорські радіоаматорські Авіамодельний, ракетомодельного Корисні, цікаві |
хитрощі майстру
електроніка фізика технології винаходи |
таємниці космосу
таємниці Землі таємниці Океану хитрощі Карта розділу |
  |
| Використання матеріалів сайту дозволяється за умови посилання (для сайтів - гіперпосилання) | |||
Навігація: => |
На головну / Каталог патентів / В розділ каталогу / Назад / |
|
ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2024871
СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ дуоденогастральногорефлюкс
Ім'я винахідника: Туєв А.В .; Голованова Е.С .; Савіна Л.В.
Ім'я патентовласника: Туєв Олександр Васильович
Адреса для листування:
Дата початку дії патенту: 1991.04.01
Використання: в медицині та біології, може застосовуватися для якісної експрес-діагностики дуоденогастрального рефлюксу. Сутність: краплі базального і стимульованого вмісту об'ємом 0,01 - 0,03 мл кожна, наносять на предметне скло, накривають кожну покривним склом, сушать при t = 35 - 38 ° С протягом 3 - 6 год, потім досліджують в поляризованому світлі. І при наявності в препаратах оптично активних дендритних включень визначають дуоденогастральногорефлюкс. Спосіб простий і дозволяє підвищити точність визначення наявності дуоденогастрального рефлюксу.
ОПИС ВИНАХОДИ
Винахід відноситься до медицини і біології і може бути використано для якісної експрес-діагностики дуоденогастрального рефлюксу (ДГР).
Відомий метод якісного і кількісного виявлення жовчних кислот в шлунковому вмісті - метод тонкошарової хроматографії (прототип).
Шлунковий вміст, отримане натщесерце, або будь-яка порція базального вмісту, отримана при фракційному дослідженні, фільтрується через марлю для видалення грудочок слизу і неперетравленої їжі, рН соку доводять до 7,0-8,0 додаванням кількох крапель насиченого розчину вуглекислого натрію. До 1 мл підготовленого таким чином шлункового вмісту доливають 5 мл 96 про етилового спирту, перемішують і нагрівають протягом 5 хв у водяному термостаті при 80 о С. Після центрифугування (3000 об / хв, 5 хв) надосадову рідину зливають в пробірки з широкою шийкою ( "цукрові стаканчики") і випарюють на киплячій бані насухо. Осад двічі промивають 5 мл ефіру з метою видалення холестерину і розчиняють в 0,2 мл 96 про спирту для якісної реакції.
Для якісного виявлення ЖК микроколичества спиртового екстракту (10-20 мл) наносять на хроматографічні пластини. Після висушування пластини виявляють обприскуванням 10% -ним спиртовим розчином фосфорномолібденовой кислоти і поміщають в сушильну шафу при 105 о С. При досить високій концентрації ЖК в шлунковому вмісті на хроматограмі виявляють їх у вигляді окремих плям. У разі невеликої концентрації - у вигляді суцільної лінії [1].
Недоліком методу є трудомісткість методу виконання в ході підготовки матеріалу і якісного виявлення ЖК, тобто підготовки його до хроматографії, а саме: повна втрата нативне шлункового вмісту за рахунок додавання 96 про етилового спирту, нагрівання протягом 5 хв при 80 о С, випарювання на киплячій водяній бані насухо, промивання в ефірі; наявність хроматографических пластин, які виробляються за кордоном.
Все вище перераховане ускладнює можливість застосування хроматографічного методу визначення ЖК в шлунковому вмісті, в зв'язку з чим зменшується можливість ранньої діагностики ДГР.
Мета винаходу - спрощення способу і підвищення точності. Зазначена мета досягається тим, що проводять крісталлооптічеськие дослідження проби у вигляді висушених крапель шлункового вмісту (середня порція базального і стимульованого вмісту) досліджуваного хворого з подальшим вивченням її оптичної картини в схрещених николях поляризационного мікроскопа.
З метою спрощення процесу і підвищення точності краплі базального і стимульованого пентагастрином вмісту, об'ємом 0,01-0,03 мл кожна, наносять на скляну пластинку, накривають покривним склом, потім сушать при Т = 35-38 о С протягом 3-6 годин , микроскопируют в поляризованому світлі і при наявності в препараті оптично активних дендритних включень реєструють зміна складу шлункового вмісту.
Спосіб здійснюють наступним чином. Середню (2-3) порцію базального і стимульованого (наприклад, пентагастрином) НЖС у вигляді крапель (3-4), об'ємом 0,01-0,03 мл кожна, наносять роздільно на предметні скельця, накривають кожну покривним склом і висушують в суховоздушной шафі при Т = 35-38 о С протягом 3-6 годин - для повного видалення вологи.
Отриманий препарат микроскопируют в поляризованому світлі (наприклад у поляризаційному мікроскопі "МІН-8") та за наявності в ньому оптично активних дендритних включень визначають присутність ЖК, а отже, наявність ДГР.
Крісталлооптічеськие дослідження виконано поляризаційним мікроскопом (МІН-8). При підвищеному вмісті ЖК і НЖС (базального і стимульованого секретів) в препаратах присутні дендритні форми.
Всім досліджуваним хворим проводили кількісне визначення вмісту ЖК в НЖС.
На фіг.1-6 представлений спосіб визначення дуоденогастрального рефлюксу.
 |
 |
 |
 |
 |
 |
Приклад 1. Здоровий С., 31 р, без спадкової обтяженості по патології шлунково-кишкового тракту.
Технологія: при зондовом дослідженні шлункового вмісту отримані 4 порції базального і 4 порції стимульованого пентагастрином секрету. На предметне скло завдали 3 краплі НЖС третьої порції базального секрету, кожна об'ємом 0,01 мл, накрили покривними стеклами і висушили в термостаті при Т = 35 о С протягом 3 год, потім мікроскопіровать. При дослідженні препаратів в поляризованому світлі мікроструктурні поверхні висушених крапель НЖС оптично активні, так як відсутні оптично активні включення. Видно розгалужені структури (фіг.1). При дослідженні третьої порції базального вмісту методом тонкошарової хроматографії ЖК не визначаються, що свідчить про відсутність ДГР.
На предметне скло завдали 3 краплі НЖС другої порції стимульованого пентагастрином секрету, кожна об'ємом 0,03 мл, накрили покривними стеклами, сушили в термостаті при Т = 38 о С протягом 6 годин, потім мікроскопіровать. При дослідженні препаратів в поляризованому світлі мікроструктурні поверхні висушених крапель НЖС оптично активні. Видно розгалужені мікротіпи (фіг.2). При дослідженні цієї ж порції стимульованого секрету методом тонкошарової хроматографії ЖК не визначаються, що свідчить про відсутність ДГР.
Модельний композит, приготований з наборів стандартних ЖК, зміст глікохолевой кислоти в яких дорівнює 80 ммоль / л. Для приготування препарату 3 краплі стандартного розчину глікохолевой кислоти, кожна об'ємом 0,01 мл, нанесли на предметні скельця, накрили предметними скельцями і сушили 3 години при Т = 35 о С, потім мікроскопіровать. При дослідженні препарату в поляризованому світлі присутні дендритні оптично активні структури (фіг.3).
Другий модельний композит, приготований з набору стандартних ЖК, зміст яких дорівнює 40 ммоль / л, завдали у вигляді 3 крапель (кожна об'ємом 0,03 мл) на предметні скельця, накрили покривними стеклами і сушили 6 ч при Т = 38 о С, препарат мікроскопіровать в поляризованому світлі. У препараті присутні дендритні оптично активні включення (фіг.4).
Приклад 2. Хворий А., 35 років. Діагноз: виразкова хвороба пілородуоденальних зони, підгостра фаза рецидиву, з локалізацією виразкового дефекту в цибулині ДПК. Функціональний дуоденостаз з наявністю ДГР (рентгенологічно і гастродуоденофіброскопіческі).
Технологія: 3 краплі НЖС третьої порції базального секрету хворого, об'ємом 0,01 мл кожна, нанесли на предметні скельця, накрили покривними стеклами і сушили в термостаті при Т = 35 о С протягом 3 год, потім мікроскопіровать в поляризованому світлі. У закристалізованій краплі присутні дендритні оптично активні включення (фіг.5). При дослідженні третьої порції базального вмісту методом, описаному в прототипі, підвищений вміст ЖК до 31,2 ммоль / л, що підтверджує наявність ДГР.
Приклад 3. Хворий І., 45 років. Діагноз: хронічний антральний гастрит, типу В, зі збереженою секреторною функцією, фаза загострення. Функціональний бульбодуоденостаз з наявністю ДГР.
Технологія: 3 краплі НЖС другої порції стимульованого секрету хворого нанесли на предметні скельця, кожна об'ємом 0,03 мл, накрили покривними стеклами, сушили 6 ч в термостаті при Т = 38 о С, потім мікроскопіровать в поляризованому світлі. У препараті виявлені оптично активні дендритні включення, які свідчать про наявність ЖК, а отже, ДГР (фіг.6). При дослідженні цієї ж порції шлункового секрету методом, описаним в прототипі, підвищений вміст ЖК до 30,1 ммоль / л, що підтверджує наявність ДГР.
Ефективність кристаллографического способу діагностики ДГР в порівнянні з прототипом полягає в тому, що, не проводячи хроматографічного та біохімічного досліджень, що вимагають великих технічних і матеріальних витрат, можна за типами оптично активних включень проводити якісний аналіз шлункового вмісту і діагностувати ДГР (бульбодуоденостаз з недостатністю пилорического жому шлунка ). Спосіб інформативний, простий у виконанні. Присутність ЖК діагностується за наявністю оптично активних дендритних форм.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ дуоденогастральногорефлюкс шляхом визначення жовчних кислот в шлунковому вмісті in vitro, що відрізняється тим, що, з метою спрощення та підвищення точності способу, краплі базальної і стимульованої порцій нативного шлункового вмісту наносять на предметне скло, накривають кожну покривним склом і сушать 3 - 6 год в термостаті при 35 - 38 o С, потім досліджують в поляризованому світлі і при наявності в препараті оптично активних дендритних включень визначають наявність дуоденогастрального рефлюксу.
Версія для друку
Дата публікації 29.03.2007гг
Коментарі
Коментуючи, пам'ятайте про те, що зміст і тон Вашого повідомлення можуть зачіпати почуття реальних людей, проявляйте повагу та толерантність до своїх співрозмовників навіть у тому випадку, якщо Ви не поділяєте їхню думку, Ваша поведінка за умов свободи висловлювань та анонімності, наданих інтернетом, змінює не тільки віртуальний, але й реальний світ. Всі коменти приховані з індексу, спам контролюється.