початок розділу Виробничі, аматорські радіоаматорські Авіамодельний, ракетомодельного Корисні, цікаві	хитрощі майстру електроніка фізика технології винаходи	таємниці космосу таємниці Землі таємниці Океану хитрощі Карта розділу
Використання матеріалів сайту дозволяється за умови посилання (для сайтів - гіперпосилання)

ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2237251

СПОСІБ ПРОГНОЗУВАННЯ РОЗВИТКУ ГНІЙНИХ УСКЛАДНЕНЬ
ПРИ ХІРУРГІЧНОМУ ЛІКУВАННІ виразкової хвороби дванадцятипалої кишки, ускладнена стенозом

Ім'я винахідника: Нестерова І.В. (RU); Фомічова Є.В.
Ім'я патентовласника: Російський центр функціональної хірургічної гастроентерології (RU); Нестерова Ірина Вадимівна (RU); Фомічова Євгенія Василівна
Адреса для листування: 350063, г.Краснодар, вул. Сивина, 4, КГМА, патентний відділ, Т.А. Дороніної
Дата початку дії патенту: 2002.11.14

Винахід відноситься до хірургічної гастроентерології та імунології і може бути використано в клініці для прогнозування ускладнень в післяопераційному періоді. Для цього визначають коефіцієнт витрачання мієлопероксидази в нейтрофільних гранулоцитах як відношення рівня її активності в стимульованої і спонтанному варіанті тесту. За умови значення коефіцієнта витрачання 0,32-0,38 визначають низький ступінь ризику розвитку ускладнення, а при відхиленні коефіцієнта витрачання мієлопероксидази в нейтрофільних гранулоцитах від зазначених значень визначають ризик розвитку післяопераційних хірургічних ускладнень. Спосіб дозволяє виявити ризик розвитку гнійних ускладнень в післяопераційному періоді, при цьому необхідно проводити для даної категорії хворих імунокоригуючою терапію, в результаті чого буде виключений ризик повторних операцій, буде оптимізовано лікування і реабілітація хворих, зменшиться термін перебування хворих в стаціонарі.

ОПИС ВИНАХОДИ

Пропонований винахід відноситься до хірургічної гастроентерології та імунології і може бути використано в клініці для прогнозування ускладнень в післяопераційному періоді.

В даний час не піддається сумніву, що порушення в системі імунітету не тільки супроводжують багато захворювань, але найчастіше обумовлюють значний внесок в механізми розвитку патологічних процесів, а й сприяють їх обтяження. В останні роки отримані об'єктивні докази того. що патологія імунної системи відіграє велику роль у розвитку захворювань гастроинтестинального тракту. У патогенезі такого поширеного захворювання, як виразкова хвороба дванадцятипалої кишки, в повній мірі проявляються дисфункції імунної системи (Аруін Л.І., 1983; Малов Ю.С., 1984; Циммерман Я.С, 1998).

Нейтрофіли як високореактівние категорія клітин служать чутливим індикатором різних порушень гомеостазу, що використовують в якості діагностичного та прогностичного критерію в клінічній практиці. У зв'язку з цим великий інтерес викликає цитохімічна маркування нейтрофілів, що пов'язано з доступністю і чутливістю подібних реакцій. Для вивчення бактерицидних систем нейтрофілів визначають активність мієлопероксидази методом цитохимического аналізу. Мієлопероксидази є ферментом, який поряд з кисневими радикалами, перекисом водню, галогенами становить ефекторні ланка киснево апарату бактерицидності нейтрофілів. Активність мієлопероксидази визначають за методом Sato і Sekija (1928). Принцип методу заснований на окисленні бензидину піроксід-пероксидазною системою до бензидинового синього. Результати враховують за допомогою імерсійної мікроскопії з подальшим розрахунком в умовних одиницях середнього цитохимического індексу. У клініці використовують визначення активності мієлопероксидази як в диференційно-діагностичних цілях (наприклад, інфаркт міокарда і стенокардія; мозковий інсульт і транзиторне порушення кровообігу; інфекції бактеріальної та вірусної природи і т.д.), так і для контролю динаміки патологічного процесу.

Однак, на думку багатьох дослідників, активність мієлопероксидази у хворих виразковим ураженням слизової оболонки шлунка і дванадцятипалої кишки коливається в широких межах і не завжди відповідає тяжкості перебігу хронічного процесу (Ашкіназі В.І., Маянскій І.В. та ін., 2000; Дягілєва О.А., Бикова І.А. та ін., 2001). Подібні дослідження не відображають повною мірою потенційні можливості нейтрофілів і при даній патології не мають достатньої прогностичної інформативності.

За прототип прийнятий спосіб визначення функціонального потенціалу нейтрофілів по реалізації неферментний катіонних білків (Нестерова І.В., Світлична М.А., 1987). Суть даного способу у визначенні змісту катіонних білків в інтактних нейтрофілах і в нейтрофідах, які зазнали активації комплексним полівалентним антигеном. При зіставленні рівня витрачання катіонного білка в активованих і інтактних клітинах визначають коефіцієнт реалізації катіонних білків, а потім зі зміни коефіцієнта реалізації щодо норми судять про наявність чи відсутність патологічного стану (Педіатрія. - 1984. - №9). Ми використовували цей метод для обстеження пацієнтів з виразковою хворобою дванадцятипалої кишки, ускладненої стенозом перед операцією, проте коефіцієнт реалізації катіонних білків знаходився в межах значень здорового контролю, не відображав тяжкості патологічного процесу і не міг бути використаний для визначення резервних можливостей нейтрофілів при даній патології. Нами була поставлена ​​задача розробити новий адекватний цитохимический тест для вирішення даної діагностичної проблеми.

Заявники пропонують визначати рівень витрачання мієлопероксидази в цитоплазмі нейтрофілів з використанням навантажувального тесту при штучної активації нейтрофілів бактеріальним антигеном в умовах in vitro, який є адекватною моделлю маніфестації патологічного процесу і дозволяє більш ефективно оцінити мобілізаційні можливості гранулярного апарату нейтрофілів, а й визначити резервний потенціал цих клітин . При неускладненому перебігу даного захворювання потенціал нейтрофілів повністю не реалізується, але згодом може зробити істотний вплив на перебіг захворювання в разі його загострення, що надзвичайно важливо для клініко-лабораторної практики.

Суть винаходу полягає в тому, що визначають коефіцієнт витрачання мієлопероксидази в нейтрофільних гранулоцитах як відношення рівня її активності в стимульованої і спонтанному варіанті тесту. За умови значення коефіцієнта витрачання 0,32-0,38 визначають низький ступінь ризику розвитку ускладнення, а при відхиленні коефіцієнта витрачання мієлопероксидази в нейтрофільних гранулоцитах від зазначених значень визначають ризик розвитку післяопераційних хірургічних ускладнень.

СПОСІБ ЗДІЙСНЮЮТЬ наступним чином

Для дослідження беруть кров з вени, стабілізовану антікоогулянтом. У 2 лунки планшета для імунологічних досліджень поміщають по 100 мкл крові. В 1 лунку додають 100 мкл фізіологічного розчину (спонтанний тест), в іншу - 100 мкл бактеріальної суспензії St. aureus в концентрації 1х10 ⁶ мікробних тіл в 1 мл фізіологічного розчину (стимульований тест). Вміст лунок обережно перемішують, після чого інкубують в термостаті при температурі +37 ° С протягом 1 години. Після інкубації вміст лунок перемішують і готують краплю-препарат на чистому, добре знежиреному предметному склі. Скло поміщають у вологу камеру для осідання клітин в строго в горизонтальному положенні. Через 10 хвилин надлишок рідини обережно видаляють нахилом скла під кутом 45 ° і сушать мазки на повітрі протягом 6-12 годин. Висушені мазки фіксують в парах 40% формаліну протягом 3-4 хвилин, промивають в проточній воді 1-2 хвилини і висушують на повітрі. Потім мазок опускають в 0,5% -ний розчин мідного купоросу на 1 хвилину, після чого переносять в свіжоприготований розчин бензидину з 2 краплями перекису водню (розчин бензидину готують, розчиняючи 100 мг бензидину в 100 мл дистильованої води при нагріванні до 80 ° С, розчин зберігається в холодильнику). Після цього мазки промивають у проточній воді протягом 1-2 хвилин і дофарбовують протягом 30-60 секунд в 0,5% -ному розчині нейтрального червоного, ще раз споліскують в проточній воді і сушать на повітрі.

При мікроскопірованіі забарвлених мазків переглядають 100 нейтрофілів. Внутрішньоклітинну активність мієлопероксидази оцінюють напівкількісної в умовних одиницях шляхом розрахунку середнього цитохимического індексу (СЦІ) за принципом Kaplow (1955). Обчислюючи відносини показника активності мієлопероксидази в стимульованому варіанті до аналогічного показника в спонтанному варіанті, визначають коефіцієнт витрачання (КР):

який демонструє функціональну активність нейтрофілів і їх резервні можливості. За умови його значення 0,35 ± 0,03 встановлюють низький ступінь ризику розвитку ускладнень, а при відхиленні значень від зазначеного рівня визначають ризик розвитку гнійних ускладнень.

Використовуючи даний тест, була досліджена периферична кров 20 умовно здорових осіб і 60 пацієнтів з виразковою хворобою дванадцятипалої кишки, ускладненої стенозом, які перенесли радикальну дуоденопластікі по В.І.Онопріеву в Російському центрі функціональної хірургічної гастроентерології (табл. 1).

Проведене дослідження підтвердило, що коефіцієнт витрачання мелопероксідази є високоефективним показником резервного потенціалу нейтрофілів, що дозволяє використовувати тест в клінічній практиці для прогнозування ризику хірургічних ускладнень при виразковій хворобі дванадцятипалої кишки, ускладненої стенозом.

Клінічні Приклади

1. Хворий PO 50 років. 17.10.99 в плановому порядку виконана радикальна дуоденопластика з приводу декомпенсованого стенозу. При визначенні рівня активності мієлопероксидази в спонтанному тесті СЦІ дорівнював 2,3. При визначенні за аналогічний показник в стимульованому варіанті тесту СЦІ дорівнював 2,07, Таким чином, коефіцієнт витрачання мієлопероксидази, обчислений за пріведененой вище формулою, склав 0,90, що говорить про глибоку дефекті киснево механізму мікробіцідной системи нейтрофілів. На підставі клінічних показників і результатів імунологічного дослідження визначена висока ступінь ризику розвитку післяопераційних ускладнень. Хворому перед операційним втручанням був призначений курс корригирующей імунотерапії. В результаті проведення передопераційної підготовки післяопераційні ускладнення були відсутні. Хворий виписаний на 8 день зі стаціонару.

2. Хворий С.В. 46 років. 20.10.01 була виконана в плановому порядку радикальна дуоденопластика з приводу субкомпенсованого стенозу. Коефіцієнт витрати, визначений за наведеним вище алгоритмом, дорівнює 0.38. Післяопераційний перебіг гладке, ускладнення відсутні, виписаний на 9 добу.

3. Хворий К.В. 31 рік. 17.10.99 була виконана в екстреному порядку радикальна дуоденопластика з приводу декомпенсованого дуоденального стенозу. В результаті проведеного імунологічного дослідження виявлені серйозні порушення в функціонуванні мікробіцідной системи нейтрофілів, коефіцієнт витрачання мієлопероксидази, визначений за наведеним вище алглоітму, дорівнює 0,82. Вочевидь, призначений імунологом лікування не проводив зважаючи на економічну недоступності препаратів. Післяопераційний перебіг важкий, перитоніт, загоєння операційної рани вторинним натягом. Виписаний на 32 добу.

При виявленні ризику розвитку гнійних ускладнень в післяопераційному періоді необхідно проводити для даної категорії хворих імунокоригуючою терапію, в результаті чого буде виключений ризик повторних операцій, буде оптимізовано лікування і реабілітація хворих, зменшиться термін перебування хворих в стаціонарі.

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

Спосіб прогнозування гнійних ускладнень при хірургічному лікуванні виразкової хвороби дванадцятипалої кишки, ускладненої стенозом, який відрізняється тим, що визначають коефіцієнт витрачання мієлопероксидази в нейтрофільних гранулоцитах як відношення рівня її активності в стимульованої і спонтанному варіанті тесту і за умови його значення 0,32-0,38 встановлюють низький ступінь ризику розвитку ускладнень, а при відхиленні значень від зазначеного рівня витрачання визначають ризик розвитку гнійних ускладнень.

Версія для друку
Дата публікації 29.03.2007гг

НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ
	Технологія виготовлення універсальних муфт для бесварочного, безрезьбовиє, бесфлянцевого з'єднання відрізків труб в трубопроводах високого тиску (мається відео)
	Технологія очищення нафти і нафтопродуктів
	Про можливість переміщення замкнутої механічної системи за рахунок внутрішніх сил
	Світіння рідини в тонких діелектричних каналох
	Взаємозв'язок між квантової і класичної механікою
	Міліметрові хвилі в медицині. Новий погляд. ММВ терапія
	магнітний двигун
	Джерело тепла на базі нососних агрегатів