початок розділу Виробничі, аматорські радіоаматорські Авіамодельний, ракетомодельного Корисні, цікаві	хитрощі майстру електроніка фізика технології винаходи	таємниці космосу таємниці Землі таємниці Океану хитрощі Карта розділу
Використання матеріалів сайту дозволяється за умови посилання (для сайтів - гіперпосилання)

ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2063681

СПОСІБ ВИРОЩУВАННЯ РОСЛИННИХ КУЛЬТУР IN VITRO
І ЖИВИЛЬНА середу ДЛЯ ЙОГО ЗДІЙСНЕННЯ

Ім'я винахідника: Висоцький В.О.
Ім'я патентовласника: Всеросійський селекційно-технологічний інститут садівництва і розсадництва
Адреса для листування:
Дата початку дії патенту: 1992.10.01

Використання: сільське господарство і біотехнологія. Суть винаходу: вирощування рослинних культур in vitro полягає в приготуванні живильного середовища і введенні в неї біоінгібітора, висадку експлантов і наступне культивування, причому в якості біоінгібітора вводять інсекто-акарицид з групи піретроїдів. Живильне середовище містить макро-, мікроелементи, вітаміни, регулятори росту та інші добавки, при цьому додатково вона містить інсекто-акарицид з групи піретроїдів в кількості 20,0-1200,0 мг / л середовища.

ОПИС ВИНАХОДИ

Заявляється винахід відноситься до біотехнології рослин, зокрема до мікророзмноження рослин на штучних поживних середовищах.

У процесі культивування стерильні культури можуть заражатися бактеріями, грибами та іншими організмами. Відомі способи зниження контамінації шляхом попереднього промивання джерел експлантов, їх стерилізації різними хімічними препаратами і дотриманням стерильності при операціях введення експлантів в стерильну культуру і пересадках для субкультівірованія [1]

Відомий спосіб, що зменшує еараженность культур під час тривалого культивування, що полягає у включенні в поживні середовища антибіотиків, зокрема тетрацикліну, що знижує виживання окремих мікроорганізмів, які випадково потрапили на поверхню живильного середовища під час пересадок [2]

Відомі способи, що перешкоджають розселенню кліщів в культиваційних приміщеннях і перезаражению культур, які полягають в фумігації лабораторних приміщень і різних видах зовнішнього застосування хімічних препаратів [3]

Недоліки цих відомих способів і живильного середовища полягають у тому, що вони не забезпечують надійної зашиті культур від активно пересуваються паразитів, якими є кліщі та їх личинки. Це пояснюється тим, що проникли в культуральні судини кліщі можуть там розмножуватися, а потім розселятися по хто стоїть поруч судинах, переносячи на поверхні тіла спори мікроорганізмів. У нових культуральних судинах цей процес повторюється і, якщо його не перервати, то він ставати лавиноподібним і тягне за собою істотні втрати матеріалу.

Відома живильне середовище [2] містить антибіотики, не може перешкоджати розмноженню і розвитку личинок кліщів in vitro.

Завдання, на вирішення якої спрямовано винахід, полягає в підвищенні ефективності захисту культур in vitro від шкідників в культиваційних судинах і збільшення виходу стерильних культур за рахунок виключення можливості інфікування культур в процесі інкубації.

Поставлена ​​задача досягається тим, що в Cпособ захисту культур in vitro, що включає приготування живильного середовища, висадку експлантов і обробку акарицидом, в живильне середовище для вирощування культур in vitro перед автоклавуванням вводять інсекто-акарицид з групи піретроїдів, після чого проводять висадку експлантов.

Поставлену задачу вирішують і і тим, що живильне середовище для здійснення способу захисту культур in vitro від шкідників, що включає амоній азотнокислий, калій азотнокислий, магній сірчанокислий, калій фосфорнокислий, кальцій хлористий, кислоту борну, марганець сірчанокислий, цинк сірчанокислий, калій йодистий, натрій молібденовокислий , мідь сернокислую, кобальт хлористий, залізо сірчанокисле, трилон-Б, тіамін, піридоксин, нікотинову кислоту, аскорбінову кислоту, сахарозу, агар-агар, 6-бензіламінопурін і воду, додатково містить інсекто-акарицид з групи піретроїдів при наступному співвідношенні компонентів, мг / л: амоній азотнокислий 1640-1660, калій азотнокислий-1890-1910, кальцій хлористий 430-450, магній сірчанокислий 360-380, калій фосфорнокислий-160-180, залізо сірчанокисле - 55-56, марганець сірчанокислий 22,2-22, 4, цинк сірчанокислий 8,5-8,7, калій йодистий 0,82-0,84, натрій молібденовокислий 0,24-0,26, мідь сірчанокисла - 0,024-0,026, кобальт хлористий 0,024-0,026, кислота борна 6,1 -6,3, трилон Б 74-76, тіамін 0,4-0,6, піридоксин 0,4-0,6, нікотинова кислота - 0,4-0,6, аскорбінова кислота 0,9-1,1, 6-бензіламінопурін 0,2-3,0, сахароза 20000-40000, агар-агар 5500-8500, інсектоакарицид з групи піретроїдів - 100-1100, вода інше.

Саме використання пропонованої живильного середовища, що приводить до загибелі кліщів в культиваційних судинах, що містить інсекто-акарицид в зазначених концентраціях, забезпечує відповідно до способу отримання культур, не заражених кльошами і відсутність можливості перезараження стерильних культур в культиваційних судинах один від одного. Це дозволяє зробити висновок, що заявляються винаходи пов'язані між собою єдиним винахідницьким задумом.

Порівняння заявляється технічного рішення з прототипом дозволило встановити відповідність їх критерію "новизна", тому що воно містить новий технологічний прийом і новий компонент живильного середовища інсекто-акарицид з групи піретроїдів.

Пропоноване технічне рішення не є очевидним для фахівців, що займаються вирощуванням стерильних культур in vitro, так як хоча з джерел інформації [3] і відоме використання акарициду для захисту стерильних культур від шкідників, але в цьому відомому способі акарицид додають у фарбу, якою пофарбовані поверхні обладнання лабораторії або застосовують його для фумігації приміщення, що повністю не вирішує питання захисту культур in vitro від шкідників, тим більше, що в цих випадках використовують акарициди іншої групи.

При вивченні інших відомих технічних рішень в цій галузі ознаки, що відрізняють заявляється винаходу від прототипу, що не були виявлені. Тому можна зробити висновок, що заявляється технічне рішення має винахідницький рівень.

Приклади ЗДІЙСНЕННЯ СПОСОБУ

Приклад 1. Готували щільних живильне середовище, що складається з мінеральних солей за рецептом Мурасіге-Скуга, мг на 1 л розчину: амоній азотнокислий 1650, калій азотнокислий 1900 кальцій хлористий 440, магній сірчанокислий 370, калій фосфорнокислий 170, залізо сірчанокисле - 55,6, трилон Б 74,6, кислота борна 6,2, марганець сірчанокислий 22,2, цинк сірчанокислий 8,6, калій йодистий 0,83, натрій молібденовокислий 0,25, мідь сірчанокисла 0,025, кобальт хлористий 0,025 з додаванням вітамінів - тіамін, піридоксин, нікотинова кислота по 0,5, аскорбінова кислота 1,0, сахароза 30000, агар-агар 7000, 6-бензіламінопурін 1,0, в яку перед автоклавуванням вносять інсекто-акарицид з групи піретроїдів в таких кількостях, мг / л: 0 (контроль) , 10, 25, 50, 100, 200, 500, 1000, 1200, 1500 і 2000. Приготовану середу доводили до кипіння, розливають по культиваційні судинах і піддавали термічній стерилізації в автоклаві при тиску 1 атм протягом 15-20 хв.

Після охолодження на поверхню живильного середовища виробляли висадку експлантов малино-ожинові гібридів Тейберрі і санберрі. Судини з висадженими експлантов поміщали в культиваційні приміщення, в яких відзначалися випадки ураження культур кльошами. Обліки проводили через 10, 20 і 30 днів, для чого виділяли облікові ділянки площею 625 квадратних сантиметрів, на яких знаходилося по 25 культиваційних судин. Відзначали інфікованість культур бактеріями і грибами. Присутність кліщів виявляли за допомогою прямого микроскопирования культиваційних судин під стереоскопічним мікроскопом МБС-9. Результати спостережень представлені в табл. 1. Як видно з наведених у табл.1 даних, надійний акарицидний ефект проявляється починаючи з концентрації 25 мг / л препарату. Для вивчення можливого фітотоксичної дії інсекто-акарицидів проводили розрахунок середнього коефіцієнта розмноження по кожному варіанту і визначення середньої довжини пагона. Сумарні дані наведені в табл.2.

Обробка отриманих даних показала істотне зниження на 0,01% рівня значущості як коефіцієнта розмноження (F = 56,2), так і середньої довжини пагонів (F = 37,8) при концентраціях в середовищі інсекто-акарициду 1500 і 2000 міліграма / л.

Приклад 2. На приготовану вищеописаним способом живильне середовище з включенням інсекто-акарицидів з групи піретроїдів в концентраціях 10, 20, 50, 100, 500, 1000 і 2000 мг / л були висаджені експланти троянди мініатюрної сорти Цвергкенінг і через місяць культивування в світловий камері, де відзначали випадки ураження стерильних культур кліщами провели оцінку зараженості судин і розвитку експлантів. Результати спостережень представлені в табл.3.

Таким чином, на підставі отриманих даних можна зробити висновок, що інтервал ефективних концентрацій інсекто-акарицидів з групи піретроїдів при включенні його в живильне середовище знаходиться в межах 20 1200 мг / л. Більш низькі концентрації не перешкоджають розселенню і розмноженню шкідників, а вищі надають фітотоксичну дію на країни, що розвиваються в культиваційних судинах експланти різних культур.

ВИКОРИСТОВУВАНА ЛІТЕРАТУРА

1. Полікарпова Ф.Я. Висоцький В.О. Тарашвілі З.Т. Методичні вказівки по клонального мікророзмноження чорної і червоної смородини. М. +1986.

2. Іванов А.І. Приходько Ю.Н. Приходько Д.П. Богомолов А.А. Удосконалення методики отримання рослин суниці методом культури апікальних меристем. В зб. Селекція і агротехніка вирощування плодових і ягідних культур в Середньому Поволжі. Куйбишевське книжкове з-во, 1989, c.63-75.

3. Blacke J. Mites and trips as bacterial and fungal vectors between tissue cultures. Acta Horticulturae, 1988, N225, p.163-66 (прототип). ТТТ1 ТТТ2

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

1. Спосіб вирощування рослинних культур in vitro, що включає приготування живильного середовища, введення в середу біоінгібітора, висадку експлантов і наступне культивування, що б тим, що в якості біоінгібітора в живильне середовище вводять інсектоакарицид з групи піретроїдів.

2. Поживна середу для вирощування рослинних культур in vitro, що містить амоній азотнокислий, калій азотнокислий, магній сірчанокислий, калій фосфорнокислий однозаміщений, кальцій хлористий, залізо сірчанокисле, трилон-Б, кислоту борну, марганець сірчанокислий, цинк сірчанокислий, калій йодистий, натрій молібденовокислий, мідь сернокислую, кобальт хлористий, тіамін, піридоксин, нікотинову кислоту, аскорбінову кислоту, сахарозу, агар-агар, 6-бензіламінопурін і воду, що відрізняється тим, що вона додатково містить інсектоакарицид з групи піретроїдів, при наступному співвідношенні компонентів, мг / л:

• Амоній азотнокислий 1640-1660
• Калій азотнокислий 1890-1910
• Кальцій хлористий 430-450
• Магній сірчанокислий 360-380
• Калій фосфорнокислий однозаміщений 160-180
• Залізо сірчанокисле 55-56
• Трилон-Б 74-76
• Марганець сірчанокислий 22,2-22,4
• Цинк сірчанокислий 8,5-8,7
• Калій йодистий 0,82-0,84
• Натрій молібденовокислий 0,24-0,26
• Мідь сірчанокисла 0,024-0,026
• Кобальт хлористий 0,024-0,026
• Кислота борна 6,1-6,3
• тіамін 0,4-0,6
• піридоксин 0,4-0,6
• Нікотинова кислота 0,4-0,6
• Аскорбінова кислота 0,9-1,1
• Б-бензіламінопурін 0,2-3,0
• сахароза 20000-40000
• Агар-агар 5500- 8500
• Інсектоакарицид з групи піретроїдів 20,0-1200
• Вода Решта До 1 л

Версія для друку
Дата публікації 04.03.2007гг

НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ
	Технологія виготовлення універсальних муфт для бесварочного, безрезьбовиє, бесфлянцевого з'єднання відрізків труб в трубопроводах високого тиску (мається відео)
	Технологія очищення нафти і нафтопродуктів
	Про можливість переміщення замкнутої механічної системи за рахунок внутрішніх сил
	Світіння рідини в тонких діелектричних каналох
	Взаємозв'язок між квантової і класичної механікою
	Міліметрові хвилі в медицині. Новий погляд. ММВ терапія
	магнітний двигун
	Джерело тепла на базі нососних агрегатів