початок розділу
Виробничі, аматорські радіоаматорські Авіамодельний, ракетомодельного Корисні, цікаві |
хитрощі майстру
електроніка фізика технології винаходи |
таємниці космосу
таємниці Землі таємниці Океану хитрощі Карта розділу |
|
Використання матеріалів сайту дозволяється за умови посилання (для сайтів - гіперпосилання) |
Навігація: => |
На головну / Каталог патентів / В розділ каталогу / Назад / |
ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2101914
Спосіб приготування ЗЕРНОВОГО міцелію ВИЩИХ ГРИБІВ
Ім'я винахідника: Кузнецов Олег Ювеналійович
Ім'я патентовласника: Кузнецов Олег Ювеналійович
Адреса для листування:
Дата початку дії патенту: 1995.09.05
Використання: сільське господарство і біотехнологія, зокрема розведення грибів. Суть винаходу: для вирощування зернового міцелію вищих грибів здійснюють підготовку субстрату шляхом змішування зерна з водою, розміщення в ємності з горловиною, витримування протягом доби і подальше инкубирование, після видалення надлишку води, протягом наступної доби, внесення добавок і стерилізацію при 121 o C , тиску 1 атм протягом 2,0 - 2,5 год, при цьому перед стерилізацією горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою, а після стерилізації субстрат струшують.
ОПИС ВИНАХОДИ
Винахід відноситься до біотехнології, а саме до способів приготування зернового міцелію грибів для подальшого використання при вирощуванні плодових тіл даних грибів.
Відомий спосіб отримання твердофазних поживних середовищ з зерна злакових для культивування грибів (Іванов Л.Ф. та ін. А.С. N 1191463, 1985). Суть методу полягає в тому, що живильне середовище, що містить зерно злакових при вологості 12-20% попередньо прогрівають при 180-260 o C протягом 2-10 хв, а потім різко охолоджують до 30-40 o C струмом стерильного повітря, насиченого водяними парами з відносною вологістю 92-98% нижче середу достерілізовивают протягом 15-20 хв при температурі 115-120 o C, охолоджують до 30-40 o C, доувляжняют стерильною водою до вологості 60-62% і інокуліруют посівним матеріалом в кількості 2 5% від початкової повітряно-сухого середовища.
Недоліками даного способу є його значна трудомісткість, необхідність застосування складного дорогого устаткування і технологічна складність проходження етапів даного способу, що в значній мірі збільшує матеріальні витрати.
Відомий і спосіб отримання зернового міцелію з використанням рідинної інокуляціонной технології (Stamets P. 1993), який являє собою комбінацію рідинної ферментації міцелію і традиційного "зернового" способу отримання міцелію. Спочатку проводять накопичення чистої ферментерной культури міцелію грибів з подальшим її висівом в стерильне зерно. Перевагою даного методу вважається швидкість отримання великої кількості материнського міцелію.
Недоліком даного способу є те, що необхідно спеціальне дороге обладнання, високі кваліфікаційні навички та вміння працюючих фахівців, а це, безсумнівно, збільшує собівартість одержуваного зернового міцелію. Іншим недоліком є те, що, незважаючи на швидкість одержуваного вихідного посівного матеріалу (4 7 днів), їм фактично замінюється лише вихідна материнська культура міцелію з чашок Петрі або пробірок зі скошеним агаром, а наступні етапи роботи схожі з такими по отриманню в подальшому зернового міцелію I, II і III генерацій.
Як прототип обраний спосіб приготування зернового міцелію вищих грибів по Lemke G. (1972), де приготування міцелію відбувається поетапно через наступні стадії:
1. До 10 кг зерна пшениці додають 15 л води, суміш варять протягом 15 - 20 хв на слабкому вогні.
2. Воду після кип'ятіння зливають через сито, зерно висушують "поверхнево", потім додають 120 г гіпсу і 30 г крейди. Ці добавки регулюють значення pH середовища, виконуючи роль буфера, гіпс і запобігає склеювання зерна.
3. Зерно засипають в 1-літрові молочні пляшки, заповнюючи їх на 2/3. Судини закривають ватяними пробками і стерилізують при температурі 121 o C і тиску 101,325 кПа протягом 1,5 год. Після автоклавування pH середовища становить 6,5 6,7.
4. Субстрат охолоджують до температури засіву 24 26 o C.
5. Посів виробляють стерильним маточним міцелієм, вирощеним в пробірках на агаризованому середовищі. Для інокуляції однієї пляшки (судини) використовують одну пробірку з маточним міцелієм.
6. Після посіву міцелію пляшки инкубируют в термостаті при температурі 24 26 o C, інспектуючи через 3 дня на відсутність конкурентної мікрофлори.
7. Через 7 10 днів після посіву міцелію на зерновий субстрат вміст судин струшують. Це запобігає склеювання зерна, прискорює ріст міцелію.
8. Через 3 4 тижні після посіву міцелій готовий до вживання.
9. До висіву повністю пророслу міцелій зберігають в холодильнику при температури 2 4 o C.
Недоліками зазначеного способу є висока і непередбачувана вибракування з засіяної партії судин (в середньому 20 40% а інколи до 60%) внаслідок ураження зерна в них нижчими грибами після проходження вищеописаних стадій по Lemke G. що в кінцевому рахунку призводить до значних втрат використовуваних злакових, їх повторної стерилізації для знищення розвинулися цвілевих грибів і, таким чином, до значних трудовитрат.
Пропонований спосіб вирощування зернового міцелію вищих грибів реалізується в такий спосіб:
1. Сухе зерно затарюється в ємності на 2/3 від їх корисного об'єму.
2. Ємності з зерном заповнюють водою таким чином, щоб вода доходила до країв ємностей приблизно на 8 10 см, оскільки при набуханні сухого зерна останнім збільшує свій обсяг приблизно в півтора рази.
3. Ємності з зерном залишаються на 24 годину для замочування зерна і ініціації проростання суперечка нижчих грибів, тобто перекладу з покоїться стану в вегетативну фазу розвитку. Після закінчення даного часу або пізніше (можлива затримка в 6 8 година) вода зливається через сито з ємностей, а зерно залишають вологим в ємностях ще протягом доби. На даному етапі при необхідності туди можуть бути додані різні композитні добавки, наприклад, крейда і гіпс. Після внесення даних добавок кожну ємність струшують і добавки рівномірно розподіляють по всьому об'єму ємності, а горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою.
Таким чином, зерно в ємностях до моменту автоклавирования має перебувати в цілому 48 годину в двох фазах водна фаза (замочування зерна в ємностях) 24 годину і волога фаза (вода видалена з ємностей, а зерно інкубується там ще добу) 24 годину.
4. Ємності поміщають в автоклав і стерилізують при температурі 121 o C, тиску 1 атм (101,325 кПа) і часу стерилізації 2 2,5 годину в залежності від обсягу стерилізується зерна в ємностях (визначається дослідним шляхом).
5.Емкості з зерном охолоджують до кімнатної температури і після цього проводять інокулюють маточним міцелієм на щільною агаризованому живильному середовищі з "цукрових" пробірок або чашок Петрі.
6. Після посіву ємності инкубируют в термостаті при температурі 24 - 26 o C або при кімнатній температурі в спеціальних кімнатах на стелажах.
7. Через 7 10 днів ємності з пророслим міцелієм струшують для запобігання склеювання зерна і активізації зростання міцелію. Даний етап можливо поєднати з перетаріванії зерна з ємностей в поліетиленові пакети. Пакети наглухо запаковують і роблять в декількох місцях проколи стерильною голкою для збереження газообміну внутрішньої ємності пакета, де знаходиться зростаючий міцелій на зернівках, з навколишнім середовищем. Пакети після цього поміщають в рефрижератор з температурою 2 4 o C. В результаті розвитку міцелію на зерні йде саморозігрів в масі міцелію до 24 26 o С, і тому умови рефрижератора не роблять інгібуючої дії на зростаючий міцелій, і він поступово охоплює всі зернівки пакета, утворюється конденсат, створюючи необхідну вологість.
8. Остаточна готовність міцелію визначається візуально міцелій розростається і з'єднує зернівки між собою в єдиний цілісний брикет білого кольору. До висіву в масу підготовленого субстрату міцелій продовжують зберігати в умовах рефрижератора при тій же температури 2 4 o C.
Використання даного способу вирощування зернового міцелію дозволяє отримати 99 100% вихід напрацьованого зернового міцелію в окремих партіях, без поразки його на етапах розростання нижчими грибами, за рахунок провокуючого виходу даних грибів зі стійкого покоїться стану - суперечка до етапу автоклавирования зерна, яке призводить до гарантованого пошкодження вегетативних форм нижчих грибів.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
Спосіб вирощування зернового міцелію вищих грибів, що включає підготовку субстрату шляхом змішування зерна з водою, видалення надлишку води, внесення добавок, стерилізацію з подальшим струшуванням, що відрізняється тим, що зерно поміщають в ємність з горловиною, після змішування з водою зерно витримують протягом доби, а після видалення надлишку води його інкубують протягом наступної доби і перед стерилізацією горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою, стерилізують при 121 o С і тиску 1 атм протягом 2,0 2,5 ч.
Версія для друку
Дата публікації 11.03.2007гг
Коментарі
Коментуючи, пам'ятайте про те, що зміст і тон Вашого повідомлення можуть зачіпати почуття реальних людей, проявляйте повагу та толерантність до своїх співрозмовників навіть у тому випадку, якщо Ви не поділяєте їхню думку, Ваша поведінка за умов свободи висловлювань та анонімності, наданих інтернетом, змінює не тільки віртуальний, але й реальний світ. Всі коменти приховані з індексу, спам контролюється.