ВИНАХІД
Патент Російської Федерації RU2101914

Спосіб приготування ЗЕРНОВОГО міцелію ВИЩИХ ГРИБІВ

Спосіб приготування ЗЕРНОВОГО міцелію ВИЩИХ ГРИБІВ

Ім'я винахідника: Кузнецов Олег Ювеналійович
Ім'я патентовласника: Кузнецов Олег Ювеналійович
Адреса для листування:
Дата початку дії патенту: 1995.09.05

Використання: сільське господарство і біотехнологія, зокрема розведення грибів. Суть винаходу: для вирощування зернового міцелію вищих грибів здійснюють підготовку субстрату шляхом змішування зерна з водою, розміщення в ємності з горловиною, витримування протягом доби і подальше инкубирование, після видалення надлишку води, протягом наступної доби, внесення добавок і стерилізацію при 121 o C , тиску 1 атм протягом 2,0 - 2,5 год, при цьому перед стерилізацією горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою, а після стерилізації субстрат струшують.

ОПИС ВИНАХОДИ

Винахід відноситься до біотехнології, а саме до способів приготування зернового міцелію грибів для подальшого використання при вирощуванні плодових тіл даних грибів.

Відомий спосіб отримання твердофазних поживних середовищ з зерна злакових для культивування грибів (Іванов Л.Ф. та ін. А.С. N 1191463, 1985). Суть методу полягає в тому, що живильне середовище, що містить зерно злакових при вологості 12-20% попередньо прогрівають при 180-260 o C протягом 2-10 хв, а потім різко охолоджують до 30-40 o C струмом стерильного повітря, насиченого водяними парами з відносною вологістю 92-98% нижче середу достерілізовивают протягом 15-20 хв при температурі 115-120 o C, охолоджують до 30-40 o C, доувляжняют стерильною водою до вологості 60-62% і інокуліруют посівним матеріалом в кількості 2 5% від початкової повітряно-сухого середовища.

Недоліками даного способу є його значна трудомісткість, необхідність застосування складного дорогого устаткування і технологічна складність проходження етапів даного способу, що в значній мірі збільшує матеріальні витрати.

Відомий і спосіб отримання зернового міцелію з використанням рідинної інокуляціонной технології (Stamets P. 1993), який являє собою комбінацію рідинної ферментації міцелію і традиційного "зернового" способу отримання міцелію. Спочатку проводять накопичення чистої ферментерной культури міцелію грибів з подальшим її висівом в стерильне зерно. Перевагою даного методу вважається швидкість отримання великої кількості материнського міцелію.

Недоліком даного способу є те, що необхідно спеціальне дороге обладнання, високі кваліфікаційні навички та вміння працюючих фахівців, а це, безсумнівно, збільшує собівартість одержуваного зернового міцелію. Іншим недоліком є ​​те, що, незважаючи на швидкість одержуваного вихідного посівного матеріалу (4 7 днів), їм фактично замінюється лише вихідна материнська культура міцелію з чашок Петрі або пробірок зі скошеним агаром, а наступні етапи роботи схожі з такими по отриманню в подальшому зернового міцелію I, II і III генерацій.

Як прототип обраний спосіб приготування зернового міцелію вищих грибів по Lemke G. (1972), де приготування міцелію відбувається поетапно через наступні стадії:

1. До 10 кг зерна пшениці додають 15 л води, суміш варять протягом 15 - 20 хв на слабкому вогні.

2. Воду після кип'ятіння зливають через сито, зерно висушують "поверхнево", потім додають 120 г гіпсу і 30 г крейди. Ці добавки регулюють значення pH середовища, виконуючи роль буфера, гіпс і запобігає склеювання зерна.

3. Зерно засипають в 1-літрові молочні пляшки, заповнюючи їх на 2/3. Судини закривають ватяними пробками і стерилізують при температурі 121 o C і тиску 101,325 кПа протягом 1,5 год. Після автоклавування pH середовища становить 6,5 6,7.

4. Субстрат охолоджують до температури засіву 24 26 o C.

5. Посів виробляють стерильним маточним міцелієм, вирощеним в пробірках на агаризованому середовищі. Для інокуляції однієї пляшки (судини) використовують одну пробірку з маточним міцелієм.

6. Після посіву міцелію пляшки инкубируют в термостаті при температурі 24 26 o C, інспектуючи через 3 дня на відсутність конкурентної мікрофлори.

7. Через 7 10 днів після посіву міцелію на зерновий субстрат вміст судин струшують. Це запобігає склеювання зерна, прискорює ріст міцелію.

8. Через 3 4 тижні після посіву міцелій готовий до вживання.

9. До висіву повністю пророслу міцелій зберігають в холодильнику при температури 2 4 o C.

Недоліками зазначеного способу є висока і непередбачувана вибракування з засіяної партії судин (в середньому 20 40% а інколи до 60%) внаслідок ураження зерна в них нижчими грибами після проходження вищеописаних стадій по Lemke G. що в кінцевому рахунку призводить до значних втрат використовуваних злакових, їх повторної стерилізації для знищення розвинулися цвілевих грибів і, таким чином, до значних трудовитрат.

Пропонований спосіб вирощування зернового міцелію вищих грибів реалізується в такий спосіб:

1. Сухе зерно затарюється в ємності на 2/3 від їх корисного об'єму.

2. Ємності з зерном заповнюють водою таким чином, щоб вода доходила до країв ємностей приблизно на 8 10 см, оскільки при набуханні сухого зерна останнім збільшує свій обсяг приблизно в півтора рази.

3. Ємності з зерном залишаються на 24 годину для замочування зерна і ініціації проростання суперечка нижчих грибів, тобто перекладу з покоїться стану в вегетативну фазу розвитку. Після закінчення даного часу або пізніше (можлива затримка в 6 8 година) вода зливається через сито з ємностей, а зерно залишають вологим в ємностях ще протягом доби. На даному етапі при необхідності туди можуть бути додані різні композитні добавки, наприклад, крейда і гіпс. Після внесення даних добавок кожну ємність струшують і добавки рівномірно розподіляють по всьому об'єму ємності, а горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою.

Таким чином, зерно в ємностях до моменту автоклавирования має перебувати в цілому 48 годину в двох фазах водна фаза (замочування зерна в ємностях) 24 годину і волога фаза (вода видалена з ємностей, а зерно інкубується там ще добу) 24 годину.

4. Ємності поміщають в автоклав і стерилізують при температурі 121 o C, тиску 1 атм (101,325 кПа) і часу стерилізації 2 2,5 годину в залежності від обсягу стерилізується зерна в ємностях (визначається дослідним шляхом).

5.Емкості з зерном охолоджують до кімнатної температури і після цього проводять інокулюють маточним міцелієм на щільною агаризованому живильному середовищі з "цукрових" пробірок або чашок Петрі.

6. Після посіву ємності инкубируют в термостаті при температурі 24 - 26 o C або при кімнатній температурі в спеціальних кімнатах на стелажах.

7. Через 7 10 днів ємності з пророслим міцелієм струшують для запобігання склеювання зерна і активізації зростання міцелію. Даний етап можливо поєднати з перетаріванії зерна з ємностей в поліетиленові пакети. Пакети наглухо запаковують і роблять в декількох місцях проколи стерильною голкою для збереження газообміну внутрішньої ємності пакета, де знаходиться зростаючий міцелій на зернівках, з навколишнім середовищем. Пакети після цього поміщають в рефрижератор з температурою 2 4 o C. В результаті розвитку міцелію на зерні йде саморозігрів в масі міцелію до 24 26 o С, і тому умови рефрижератора не роблять інгібуючої дії на зростаючий міцелій, і він поступово охоплює всі зернівки пакета, утворюється конденсат, створюючи необхідну вологість.

8. Остаточна готовність міцелію визначається візуально міцелій розростається і з'єднує зернівки між собою в єдиний цілісний брикет білого кольору. До висіву в масу підготовленого субстрату міцелій продовжують зберігати в умовах рефрижератора при тій же температури 2 4 o C.

Використання даного способу вирощування зернового міцелію дозволяє отримати 99 100% вихід напрацьованого зернового міцелію в окремих партіях, без поразки його на етапах розростання нижчими грибами, за рахунок провокуючого виходу даних грибів зі стійкого покоїться стану - суперечка до етапу автоклавирования зерна, яке призводить до гарантованого пошкодження вегетативних форм нижчих грибів.

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ

Спосіб вирощування зернового міцелію вищих грибів, що включає підготовку субстрату шляхом змішування зерна з водою, видалення надлишку води, внесення добавок, стерилізацію з подальшим струшуванням, що відрізняється тим, що зерно поміщають в ємність з горловиною, після змішування з водою зерно витримують протягом доби, а після видалення надлишку води його інкубують протягом наступної доби і перед стерилізацією горловину ємності закривають алюмінієвою фольгою, стерилізують при 121 o С і тиску 1 атм протягом 2,0 2,5 ч.

Версія для друку
Дата публікації 11.03.2007гг


НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ НОВІ СТАТТІ ТА ПУБЛІКАЦІЇ

Технологія виготовлення універсальних муфт для бесварочного, безрезьбовиє, бесфлянцевого з'єднання відрізків труб в трубопроводах високого тиску (мається відео)
Технологія очищення нафти і нафтопродуктів
Про можливість переміщення замкнутої механічної системи за рахунок внутрішніх сил
Світіння рідини в тонких діелектричних каналох
Взаємозв'язок між квантової і класичної механікою
Міліметрові хвилі в медицині. Новий погляд. ММВ терапія
магнітний двигун
Джерело тепла на базі нососних агрегатів